Фактор I - фібриноген - білок, що знаходиться в плазмі в розчиненому стані. У процесі згортання крові він стає нерозчинним, утворюючи фібрин.
Фактор II - протромбін - білок плазми - неактивний попередник тромбіну. Тромбін (ІІа) сприяє перетворенню фібриногену в фібрин, активує тромбоцити, з яких під його впливом звільняються клітинні фактори згортання.
Фактор III - тканинної тромбопластин (тканинної фактор) - ліпопротеїд, який звільняється при пошкодженні тканин, вступаючи в плазму крові, він впливає на протромбін, перетворюючи його в тромбін. Аналогічною дією володіє тромбокінази плазми.
Фактор IV - іонізований кальцій.
Фактор V - проакцелерін, Ас-глобулін, лабільний фактор, акцелератор перетворення протромбіну.
Фактор VI - акцелерін - білок глобулиновой природи, прискорює перетворення протромбіну в тромбін.
Фактор VII - проконвертин, стабільний фактор, неактивна форма ферменту конвертин.
Фактор VIII - антигемофільний глобулін, бере участь в утворенні тромбокінази.
Фактор IX - фактор Крістмаса, антигемофільний глобулін-В - каталізує утворення тромбокінази.
Фактор Х - фактор Стюарта-Прауера, бере участь в утворенні тромбокінази і безпосередньо в перетворенні протромбіну в тромбін.
Фактор ХI - фактор Розенталя - прискорює утворення тромбокінази.
Фактор XII - фактор Хагемана, контактний фактор.
Фактор ХIII - фібрінстабілізірующій фактор, фибриназа, бере участь в переході розчинного фібрину в нерозчинну форму.
Крім плазмових, у згортанні бере участь ряд клітинних факторів, що виділяються форменими елементами крові. Першорядну роль відіграють тромбоцитарний фактори. Позначаються вони як Р1, 2, 3, 4, РII. При агрегації тромбоцитів з них виділяються речовини, які прискорюють процес згортання крові. Найбільше значення для згортання має тромбоцитарний фактор 3 (фосфолипид).
Більшість з перерахованих вище ферментів синтезується в печінці. Для синтезу факторів II, VII, IX та Х необхідний вітамін К.
Згортання крові умовно протікає в 3 фази.
Фаза 1 - формування активної протромбокінази.
Є 2 механізму активації згортання крові - "зовнішній" (при надходженні в кров тканинного тромбопластину) і "внутрішній" (без тканинноготромбопластину).
При зовнішньому механізмі активації фактор III (з пошкоджених тканин або зруйнованих формених елементів) вступає у взаємодію з фактором VII і в присутності іонів кальцію швидко утворює активатор фактора Х. Активоване фактор Х (Ха) в комплексі з фактором V, фактором 3 тромбоцитів і іонами кальцію трансформують протромбин.
У внутрішньому механізмі беруть участь фактори ХII, ХI, IХ, VIII поряд з факторами Х, V, тромбоцитарним фосфоліпідом та іонами кальцію, які є загальними для обох механізмів. Каскад згортання полягає в наступному: контакт крові з чужорідною поверхнею (наприклад, скло пробірки при запуску механізму in vitro) активує фактор XII, який активує фактор ХI, той у свою чергу фактор IХ. Активоване фактор IХ (IХа) у присутності фосфолипида, іонів кальцію та фактора VIII активує фактор Х. Активоване фактор Х (Ха) у поєднанні з фосфоліпідом, фактором V і кальцієм (протромбокіназа) бере участь у перетворенні протромбіну.
Фаза 2 - тромбінообразованія - полягає в перетворенні протромбіну в тромбін під впливом активного комплексу протромбокінази. В основі перетворення протромбіну лежить розщеплення його молекули на фракції, одна з яких з молекулярною масою 37 тис. Переводиться фактором Ха в тромбін. Реакція вимагає наявності іонів кальцію і прискорюється в присутності фактора V і фосфолипида.
Фаза 3 - фібрінообразованія - полягає в перетворенні фібриногену в фібрин за участю тромбіну. Тромбін отщепляет від фібриногену по два пептиду А і В, що веде до полімеризації залишилися фібрин-мономерів з утворенням фібрин-полімеру, розчинного у мочевине. Стабілізація молекули фібрину відбувається під впливом активованого тромбіном фактора ХIIIа і полягає у формуванні поперечних глютамин-лізінових зв'язків між одиницями фібрину, в результаті чого утворюється міцна (не розчинний у мочевине, монохлоруксусной кислоті та інших розчинниках) фібринових сітка.
Найбільш загальне уявлення про коагуляції дає час згортання цільної крові. Простим і зручним є метод Моравіца: на годинне скло наносять краплю крові, взятої з пальця або мочки вуха, діаметром 4-6 мм. Тонким запаяним скляним капіляром проводять кожні 30 сек. по поверхні краплі. Час згортання визначають у момент появи перших фібрінових ниток, що тягнуться за капилляром.
У методі Лі-Уайта використовують венозну кров. Пробірку з 1 мл венозної крові встановлюють на водяній бані при 37 ° С і включають секундомір. Через кожні 30 сек. пробірку нахиляють під кутом 45 °. Час від моменту взяття крові до появи згустку є часом згортання крові.
У здорових людей час згортання цільної крові становить 5-8 хв.
Загальну оцінку кінцевого етапу згортання крові дає тромбіновий час, тобто час згортання цитратной плазми крові під впливом стандартної дози тромбіну.
Метод Сірман в модифікації Рутберг: в пластикову пробірку вносять 0,1 мл досліджуваної крові, додають 0,1 мл підігрітого до 37 ° С ізотонічного розчину хлориду натрію і інкубують суміш протягом 60 сек. при 37 ° С. Потім вносять 0,1 мл стандартизованого розчину тромбіну (розчин тромбіну такої активності, який в суміші з рівним об'ємом донорської плазми викликає згортання останньої за 15 с), включають секундомір і відзначають час згортання плазми крові. У нормі тромбіновий час одно 14-16 сек.
Метод визначення фібриногену по Рутберг. До 1 мл плазми крові додають 0,1 мл 5% -ного розчину хлориду кальцію і 0,1 мл розчину тромбіну (активність - 15 сек.). Утворився згусток переносять на знезолений паперовий фільтр і просушують іншим фільтром до сухого стану. Зважують сухий фібрин на торсіонних вагах. У нормі маса сухого фібрину - 9-12 мг. Для розрахунку концентрації фібриногену в плазмі крові масу згустку множать на експериментально встановлений коефіцієнт 22,2. У нормі концентрація фібриногену в крові дорівнює 0,2-0,4 г в 100 мл.
Для виявлення заблокованих продуктів деградації фібриногену (ПДФ) і фібрин-мономерів, що характерно для дисемінованого внутрішньосудинного згортання (ДВЗ-синдром), застосовують так звані паракоагуляціонних проби (етанолову, протамин-сульфатну, b -нафтоловую) і тести з протеазами з деяких зміїних отрут .
Тест на толерантність плазми до протамин-сульфату. У 1-й пробірці проводять визначення часу згортання цитратной плазми крові під впливом тромбіну (тромбіновий час), у 2-й - те ж визначення, але після додавання рівного об'єму (0,1 мл) 0,01% -ного розчину протамін-сульфату . Різниця в часі згортання плазми крові в 1-й і 2-й пробірках в нормі становить 7-10 сек. Збільшення цієї різниці (більше 7-10 сек) свідчить про збільшення в крові гепарину (протамин-сульфат має здатність зв'язувати вільний гепарин) та інших антитромбіном.
Якщо кінцевий етап згортання не порушений (тромбіновий час нормально), то окремо оцінюють зовнішній і внутрішній механізми активації згортання (формування протромбінази, трансформирующей протромбин в тромбін). Зовнішній механізм сумарно оцінюють за допомогою тесту протромбінового часу по Квіку (часу згортання рекальцінірованной цитратной плазми при додаванні до неї тканинного тромбопластину стандартизованої активності).
Метод Квик У пробірку вносять 0,1 мл випробуваної плазми крові, 0,1 мл суспензії тромбопластину (активність тромбопластину тестується на нормальній донорській плазмі), ставлять у водяну баню при 37 ° С на 60 сек. Потім доливають 0,1 мл 0,025 М хлориду кальцію і включають секундомір. Відзначають час згортання крові. Досвід повторюють 2-3 рази і визначають середній показник.
Протромбіновий час при стандартизованому тромбопластином в нормі становить 12-15 сек. Оскільки можуть бути відхилення в активності окремих серій тромбопластина, то вдаються до обчислення протромбінового індексу за формулою:
А / В ґ 100,
де А - протромбіновий час плазми крові донора-В - протромбіновий час досліджуваної особи.
У нормі цей показник дорівнює 80-100%.
При нормальному тромбінового часу порушення зовнішнього механізму можуть бути обумовлені дефіцитом факторів VII, Х, V або II, оскільки всі вони визначаються протромбінового часу. При нормальному тромбінового і протромбіновому часу порушення внутрішнього механізму згортання залежать тільки від факторів ХII, ХI, IХ і VII. Для оцінки внутрішнього шляху активації згортання крові використовують загальні коагуляційні тести: час згортання цільної крові, парціальний (часткове) тромбопластичних час (або каолін-кефаліновое час), аутокоагуляціоннийтест.
Активований частковий тромбопластиновий час (АЧТЧ) - часрекальцифікації бідної тромбоцитами плазми крові в стандартних умовах, створюваних внесенням каоліну - активатора ХII чинника і Кефалінія - аналога 3-тромбоцитарного фактора, для виключення впливу тромбоцитів на результат дослідження (метод Proctor із співавт.). У пластикову пробірку вносять 0,1 мл бідної тромбоцитами цитратной плазми, 0,1 мл каолін-кефалінового суспензії, змішують і інкубують при 37 ° С протягом 3 хв. Додають 0,025 М хлориду кальцію рівного об'єму (0,1 мл), підігрітого до 37 ° С, і включають секундомір. Відзначають час утворення згустку. У нормі активований частковий тромбопластиновий час становить 30-40 сек.
Аутокоагуляціоннийтест (АКТ) (за Беркарда із співавт.). Стандартизація фосфоліпідної і контактної активації початкової фази процесу згортання здійснюється додаванням до рекальцінірованной плазмі крові гемолізаті еритроцитів досліджуваного хворого (аутотест).
За даними, отриманими через 2-6-8-10-20-30-40-50-60 хв після додавання гемолізат-кальцієвої суміші, будують графік, висхідна частина якого відображає динаміку наростання активності тромбопластину і тромбіну, спадна частина - швидкість інактивації тромбіну за рахунок антитромбіном і продуктів фібринолізу.
Найцікавіші новини