Для приготування дефібринованої крові найбільш часто використовують трікалевую, дікалевую сіль етилендіамінтетраоцтової кислоти (ЕДТА), тринатрий-цитрат і гепарин. Перші дві речовини інгібують коагуляцію шляхом видалення кальцію з крові.
З відомих антикоагулянтів 1-ї фази згортання найбільшу фізіологічне значення мають інгібітор активованого фактора ХI (ХIа), що відноситься до # 945--2-глобулинам, і антітромбопластіни (інгібітори комплексу фактор III - фактор VIIа). До інгібіторів 2-ї фази коагуляції відноситься антитромбін II - # 945--2- # 947-лобулін крові-інгібує не тільки тромбін, але й інші активовані фактори згортання - Ха, IХа, ХIа, ХIIа, калликреин. На антитромбін III припадає велика частина спонтанної антикоагулянтной активності, що визначає його провідну роль у підтримці рідкого стану крові та попередження тромбозів. Частка інших природних антитромбіном - # 945--2-макроглобуліну та # 945--1-антитрипсину становить лише близько 25% антикоагулянтной активності дефібринованої плазми крові.
Фібриноліз здійснюється протеолітичної ферментної системою крові - плазмогеплазміном. Перетворення плазміногену в активну форму відбувається за допомогою активаторів, які знаходяться в плазмі крові, сечі, різних тканях- образуясь в ендотелії судин. Виявляється в сечі активатор (урокиназа) продукується ниркою. Здатністю активувати плазміноген володіють і деякі продукти бактеріального походження, зокрема стрептокиназа.
Під впливом активаторів відбувається ферментативне розщеплення молекули плазміногену і утворюється плазмін, що володіє вираженим протеолітичним властивістю відносно фібрин-фібриногену (крім того, факторів VII, V, комплементу, деяких гормонів). Лізис фібриногену відбувається в кілька етапів. Спочатку після відділення дрібних фрагментів А, В, С формується високомолекулярна Х-фракція. Потім вона розщеплюється на D- і Y-фракції. Надалі Y-фракція розщеплюється на другу D- і додаткову Е-фракцію. D- і Е-фракції - це кінцеві продукти деградації фібриногену. Деградація плазміном розчинної фібрину схожа з такою фібриногену, за винятком того, що на першому етапі відсутні дрібні фрагменти. Деградація стабілізованого фібрину відрізняється освітою замість D-фракції подвійного за розміром фрагмента-D-димеру.
Ферментативний фибринолиз підтримують комплексні сполуки гепарину з фібриногеном, адреналіном, сечовиною, плазмогенов, що володіють здатністю лизировать нестабілізовані згустки фібрину (неферментативне фибринолиз). Фібрин може лізуватись протеазами, які виділяються лейкоцитами, які беруть участь у фібринолізі також завдяки звільненню лейкоцитарних активаторів плазміногену і фагоцитозу продуктів розщеплення фібрину.
Терапевтичну стимуляцію фібринолізу проводять за допомогою ферментів бактеріального походження (стрептокіназа та ін.) Або урокінази.
Уявлення про фібринолітичноїактивності крові дає її визначення еуглобуліновим методом. Метод Ковальського (осадження в кислому середовищі і при низькій температурі еуглобуліновой фракції, що містить фактори згортання крові та фібринолізу, головним чином плазминоген). 0,1 мл оксалатній плазми (1: 9) поміщають в центрифужную пробірку, додають 1,8 мл кислої води (рН 5,2), пробірку ставлять у холодильник при 4 ° С (при цьому з плазми випадає еуглобуліновая фракція). Через 30 хв пробірку виймають і центрифугують протягом 10 хв при 2000 об. / Хв. Надосадову рідину відсмоктують, до осаду доливають 0,1 мл бората натрію і ставлять в термостат при 37 ° С на кілька хвилин до повного розчинення осаду. Додають 0,1 мл розчину хлориду кальцію (що міститься в еуглобіновой фракції фібриноген перетворюється на фібрин). Засікають час утворення згустку і ставлять пробірку в термостат до повного лізису згустку. Час від моменту утворення згустку до його розчинення висловлює фібринолітичну активність крові, яка в нормі дорівнює 3-4 год.
Застосовують методи дослідження фібринолізу, засновані на додатковій стандартизованої активації його стрептокіназою, а також методи виявлення в плазмі крові продуктів фібринолізу - ПДФ (імунологічні та хімічні) і їх з'єднань з фібрин-мономерами і фібриногеном (паракоагуляціонних проби), методи дослідження неферментативного фібринолізу по Б. А. Кудряшову.
Найцікавіші новини