Збудниками хвороби є ретровірус людини - Т-лімфотропний вірус (HTLV-III). Сімейство ретровірусів складається з двох підродин - онко та ленти (повільних) вірусів. ВІЛ містить особливий фермент - зворотну транскриптазу (ревертазу), обусловливающую транскрипцію генетичної інформації з вірусної РНК на ДНК, і далі - класичним шляхом через іРНК на білок. Вірус, на відміну від своїх сусідів по сімейству, володіє високою мінливістю: 1000 мутацій на 1 ген, (для порівняння - у вірусагріппа, за даними різних авторів, у 30 - 1 млн разів менше (!)). Геном ВІЛ включає 7 регуляторних генів, на 4 більше, ніж у решти представників сімейства ретровірусів. Сума генів забезпечує ВІЛ освіту вірусних-капсульних білків, ревертази, білків, керуючих активністю збудника, його инфекционностью і т.д.
Відомий ВІЛ-1 з локалізацією в Північній Америці, Західній Європі, Центральній Африці і ВІЛ-2 - у Західній Африці, Португалії, Франції, Німеччини. ВІЛ має виражений тропізм до лімфоїдної тканини, в першу чергу до Т-клітинам, які мають рецептор CD4. Зазвичай, проникнувши в клітину, вірус залишається в латентному стані, іноді роками, якщо тільки якась вторинна інфекція не призведе до стимуляції заражених Т-лімфоцитів. Тоді настає активація ВІЛ з бурхливим синтезом вірусних частинок і загибеллю Т-хелперів. Тим не менш, інфікованість типів клітин ВІЛ в організмі значно ширше, як і способи проникнення вірусів у клітину. Крім взаємодії ВІЛ з рецептором CD4, він може: проникати через Fc-y-pe-рецептор клітин, будучи пов'язаним зі специфічними противірусними AT і навіть з неспецифічними ауто- і аллоантітел до тканинних Аг людини, амінокислотні послідовності яких виявляються в зовнішньому оболонковому білку ВІЛ- проникати в різні клітини-мішені у вигляді псевдовіруса, що містить геном ВІЛ, а оболонку будь-якого іншого вірусу, наприклад, герпесу, аденовірусів, паповавирусов тощо.- проникати в клітини, що не мають рецептор CD4, наприклад, В-лімфоцити, нейтрофіли (вважають можливим взаємодія пептидів гіперваріабельної петлі білка gpl20 ВІЛ з ще не ідентифікованими структурами Т-лімфоцитів та інших клітин господаря) - проникати в клітку у вигляді комплексу ВІЛ з у-інтерфероном через інтерфероновий рецептор. В останні роки встановлено, що певний внесок у взаємодію ВІЛ з Т-лімфоцитами і моноцитами вносять молекули адгезії, зокрема, интегрин LFA-1, який може виконувати роль ко-ре-цепторной молекули на додаток до CD4, що взаємодіє зі своїми лігандами ICAM- 1, -2, -3. Це було підтверджено за допомогою моноклональних анти-LFA-l AT, блокуючих інфікування клітин ВІЛ, як і асоціацією AT проти всіх трьох лігандів ICAM.
Збудник СНІДу виявляється не тільки в Т-лімфоцитах, але і в інших лімфоїдних і нелімфоідних клітинах (клітини Лангерганса, макрофаги / моноцити, еозинофіли, мегакаріоцити, нейро-ни, мікроглія, астроцити, ендотеліоцити, олігодендроціти, клітини кишкового епітелію і т.д. ). Він виявлений в спермі, крові, слині, слізної рідини, грудному молоці годуючих матерів. Серед захворілих 70-80% складають гомосексуалісти і бісексуали, 12-18% - наркомани, 7% - жінки - партнери хворих на ВІЛ-інфекцію, 1,1% - діти хворих, 0,6% - хворі на гемофілію, в 6-7% випадків шляхи передачі інфекції поки не з'ясовані. Головними шляхами зараження ВІЛ є статеві контакти з хворими, переливання інфікованої крові і її препаратів, заражені шприци та голки, передача з молоком матері, трансплантація органів і тканин. Існує професійне зараження стоматологів, хірургів в 1,5-2% випадків. Передача збудника через слину і кусающими комахами досі виключається, однак в організмі постільних клопів вірус зберігає свою життєздатність протягом 60 хвилин (!).
Інкубаційний період складає від 4-6 місяців до 3-5 і більше років. Однак, у деяких хворих перші ознаки ВІЛ-інфекції у формі збільшення лімфатичних вузлів і підвищення температури розвиваються через 4-6 тижнів. При трансплантаційної передачі прихований період становить зазвичай 4-8 місяців. Середній період між появою специфічних AT в крові (наявність інфекції!) І розвитком симптомів СНІД становить 7-11 років. У 5% інфікованих захворювання розвивається в перші 3 роки. У наступні 8 років ВІЛ-інфекція розвивається у 3-7% осіб щорічно з числа заражених. У 65% інфікованих осіб клінічні прояви СНІДу розвиваються впродовж 16 років (Хаитов Р. М., Ігнатьєва Г. А., 1992).
На підставі порушення вірусом імунітету виникає різна патологія. Розрізняють 3 великих і 6 малих симптомів захворювання. Великі - втрата маси тіла на 10 і більше відсотків, тривала лихоманка більше 1 місяця, хронічна діарея більше 1 місяця-Малі - постійний кашель більше 1 місяця, генералізований сверблячий дерматит, повторний оперізуючий лишай, генералізована лімфаденопатія. В. В. Покровським і О. В. Юрін розроблена наступна клінічна класифікація ВІЛ-інфекції:
I. Стадія інкубації.
II. Стадія первинних проявів а / гостра гарячкова форма
б / бессимптомная фаза в / генералізована лімфаденопатія
III. Стадія вторинних захворювань
а / втрата маси тіла менше 10%, поверхневі грибкові, бактеріальні, вірусні ураження шкіри і слизових оболонок, оперізуючий лишай, повторні фарингіти, синусити.
б / прогресуюча втрата маси тіла на 10%, незрозуміла лихоманка або діарея більше 1 міс., «волосиста» лейкопенія, туберкульоз легенів, повторні або стійкі бактеріальні, грибкові, вірусні, протозойні ураження внутрішніх органів (без дисемінації) або глибокі ураження шкіри і слизових оболонок, повторний або дисемінований оперізуючий лишай, локалізована саркома Капоші.
в / генералізована бактеріальна, вірусна, грибкова, протозойная, пневмоцистна пневмонія, кандидоз, атипові мікобактеріози, позалегеневий туберкульоз, кахексія, дисемінована саркома Капоші, ураження ЦНС різної етіології.
IV. Термінальна стадія.
У частини хворих захворювання протікає з переважним ураженням шлунково-кишкового тракту, запальний процес від гіперемії до некрозу поширюється на всю кишкову трубку. У хворих виявляються наполеглива діарея, явища стоматиту, езофагіту, проктиту. Запалення викликають грибки кандида, віруси, мікобактерії, криптококки.
Іноді захворювання набуває генералізований характер, в запальний процес втягуються легені, шлунково-кишковий тракт, шкіра, нервова система, а збудниками є цітомегаовірус, паповавирусов, токсоплазми, грибки кандида, віруси, мікобактерії, криптококки. Крім того, захворювання може протікати з переважним ураженням очей у вигляді кон'юнктивіту, кератиту, ретиніт, ретинального періфлебіти, крововиливів в клітковину, появою білої плями зі зниженням зору.
Ураження центральної нервової системи може бути самостійним проявом клініки СНІДу або поєднуватися з ураженнями інших органів і систем. Хворих турбує головний біль, порушення рівноваги, прогресує деменція. Причиною неврологічних порушень може бути дія вірусу на нервову тканину, а також герпес вірусів, наприклад, цитомегаловірусу, вірусу Епстайна-Барр, внаслідок сформованого у хворого імунодефіциту. Поряд з активацією умовно-патогенної флори у хворих на СНІД клінічні прояви можуть бути обумовлені розвитком пухлинного процесу, особливо часто у вигляді саркоми Капоші.
Дія ВІЛ на імунну систему характеризується:
- Зниженням загальної кількості Т-лімфоцитів за рахунок субпопуляції Т-хелперів;
- зниженням функції Т-лімфоцитів за рахунок різкого порушення функції Т-хелперів;
- підвищенням функціональної активності В-лімфоцитів, через що збільшується спонтанна продукція імунних глобулінів і зростання їх концентрації в сироватці крові;
- В результаті вторинних імунних порушень, знижується здатність В-клітин відповідати продукцією імуноглобулінів на новий Аг, одночасно збільшується кількість ЦВК;
- Зниженням цитотоксичної активності натуральних кілерів і клітинно-опосередкованої цитотоксичності;
- порушенням функції клітин моноцитарного ряду, зокрема знижується хемотаксис, цитотоксичность, продукція ІЛ-1. Одночасно збільшується вміст а-інтерферону, з'являються антілімфоціторние AT, супресорні фактори, знижується рівень тимозина в сироватці крові і збільшується (3-2-микроглобулин і а-1-тимозин. У частини хворих також знижується абсолютне число і функціональна активність природних кілерів, проліферативний відповідь на мітогени і Аг, шкірні реакції на туберкулін, кандідін, трихофітії, правцевий, дифтерійний та інші Аг. Виявляється гіпергаммагло-булінемія.
Специфічна діагностика включає кілька рівнів:
1. Виявлення антитіл проти вірусу імунодефіциту людини
Виявлення AT проти ВІЛ виконується за допомогою методів імуноферментного (ІФА), радіоімунного, іммунометріческіе аналізів, коли у використовуваних тест-системах застосовують вірусні лізати, рекомбінантні вірусні білки або синтетичні пептидні вірусні Аг. Крім них застосовують метод імунного блотингу або Вестерн блоту, суть якого полягає в тому, що після розгону в електрофорезі білків ВІЛ їх окремі фракції переносять нанітроцеллюлёзную (чи іншу) мембрану, вирізують відповідну смужку, яка містить конкретний пептид ВІЛ, і інкубують її з матеріалом, що містить передбачувані AT до ВІЛ. Візуалізують реакцію за допомогою тієї ж ІФА. Використовують також реакцію аглютинації (латексну, желатинову, еритроцитарної) і радіоіммунопреціпітацію (метаболічно мічений ізотопами біоматеріал руйнують для виділення мічених Аг, які потім зв'язуються з AT і отримані комплекси Аг-АТ виділяють і аналізують на радіоспектрометр).
2. Виявлення вірусних Аг
Виконується за допомогою тих же методів: ІФА, радіоімунного аналізу, радіоіммунопреціпітаціі, в яких застосовуються, як правило, моноклональні стандартні AT проти Аг ВІЛ.
3. Виявлення клітин, що експресують білки ВІЛ
Для цієї мети застосовуються методи мікроскопічної або проточною лазерної цитофлуориметрії, що виявляють клітини, що містять вірусні Аг, які марковані обробкою специфічними міченими AT (ФИТЦ, фікоеритрину, стрептавідином) - імуногістохімічні методи (ті ж принципи, але AT кон'югуються з ферментами, в подальшому викликають кольорову реакцію при взаємодії з субстратами, яка виявляється мікроскопріческі або колориметрически) - методи електронної мікроскопії (AT мітять флуорохромами, ферментами, колоїдним золотом) - методом твердофазного ІФА, в якому застосовуються заражені ВІЛ клітини, адгезірованних на поверхні полістиролу.
4. Виявлення в клітинах людини противірусної ДНК або РНК ВІЛ
Аналізує клітини периферичної крові і клітини, отримані при біопсії лімфовузлів, мигдалин і аденоїдів (вони містять ВІЛ в 10-15 разів більше, ніж клітини крові!). Виконується методами гібридизації нуклеїнових кислот і полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР). Висока доцільність цих методів обумовлюється тим, що визначення специфічних анти-ВІЛ AT «пропускає» кожного десятого інфікованого. Це викликає зараження ВІЛ реципієнтів при трансфузии їм перевіреної крові інфікованих осіб. З цієї причини в даний час будь донорська кров, навіть тестована на AT і Аг ВІЛ, вважається джерелом інфекції ВІЛ та може бути застосована лише за життєвими показаннями. Додатковою гарантією точної ВІЛ-діагностики хворого, що виявляє інфікованість вірусом до того, як утворюються специфічні AT або клітини, є поіменні методи. Вони дозволяють виявити в інфікованих клітинах інтегровану в їх геном провірусну ДНК і саму вірусну РНК.
У першому методі в реакційну середу, що містить клітини периферичної крові (або з інших джерел) інфікованої ВІЛ хворого, вносять специфічні нуклеотидні зонди з генома ВІЛ, які створюють спеціфічесікій гібрид з ДНК провируса і геномної та інформаційної РНК ВІЛ, що містяться в заражених клітинах. Зонд метится або сульфонового групами, які виявляють ІФА в клітинах моноклональними AT, або флуорохромами, радіоізотопами (виявляють Радіоавтографія, флуориметра та ін.). Метод високочутливий, реагує при безсимптомній і серонегативной інфекції геном ВІЛ в кожній з десяти мононуклеарних клітин. При використанні методу ПЛР, в якому застосовують специфічні олігонуклеотидних «затравки», що дозволяють викликати множення в досліджуваному матеріалі шуканого гена ВІЛ та накопичення його в кількості, достатній для виявлення методом ПЛР, вдається визначити навіть один вірусний геном в геномі однієї зараженої клітини, що знаходиться серед мільйона незаражених клітин або клітин, інфікованих якими або іншими (Не ВІЛ) вірусами. Додається нуклеотидная запал («праймер») відповідає консервативним і унікальним відрізкам генома ВІЛ, яких немає в ДНК клітин господаря, вона багаторазово копіюється за допомогою ДНК-полімерази, накопичуючись в достатніх для аналізу кількостях. Далі спеціальними методами вона «злучається» (утворюються гібридні молекули) з потрібним геном ВІЛ в клітинах, якщо, звичайно, клітини їм вражені, і вірусний ген виявляється у взятому від хворого матеріалі. Виявлення однієї вірусної РНК буває недостатньо, тому дозволяє встановити лише 65% носіїв провірусної ДНК.
5. Виявлення зрілих віріонів
Виконується різними способами. Насамперед зараженням культур клітин in vitro, в яких «розмножилися» ВІЛ виявляються за допомогою AT, аналізу нуклеїнових кислот і зворотної транскриптази. Даний фермент не специфічний для ВІЛ, але виявлений тільки в ретровірусів, що дозволяє виконати орієнтовний аналіз при підозрі на ВІЛ-інфекцію. В клітинний супернатант, що містить передбачуваний ВІЛ, додають специфічну затравку ДНК (і 3Н-тимідину трифосфат) і зворотну транскриптазу, яка синтезує з неї ДНК на матриці вірусної РНК. Активність ферменту визначають за сумарною радіоактивності препарату.
Здійснюється також зараження лабораторних тварин (кроликів, мишей лінії SCID-hu, мавп) інфікованим матеріалом, а далі інфекція виявляється клінічно і лабораторно описаними методами. Нарешті, віріони досліджуються Електронномікроскопічно, методами гистохимии, флуоресценції, а також по здатності індукувати утворення синцития в чутливих клітинних культурах MOLT-4, CEM-SS, VB, С8166 та ін. У нашій країні досить широко використовується визначення анти-ВІЛ AT. Відзначають, що якщо ІФА виявляється двічі позитивним, сироватки далі перевіряють в иммуноблотинга (Вестерн блот). Якщо не виявляється AT до гликопротеидам gp41,120,160, а вони спрямовані проти інших Аг, реакція вважається сумнівною і через 3,6,12 місяців повторюється. При позитивній реакції з Аг р24 (24 кД) сироватка досліджується на наявність Аг ВІЛ-2. Якщо і через рік реакція з gp 120,41,160 негативна, пацієнт знімається з обліку, але довічно звільняється від донорства.
Нерідко клініцисти ставлять Можливий діагноз СНІДу без лабораторного підтвердження - при: кандидозах стравоходу, трахеї, бронхів або легких- позалегеневого кріптоспорідіозе- цитомегаловірусної ураженні інших органів (крім печінки) тривалістю більше місяця-саркомі Капоші у осіб молодше 60 років-первинної лимфоме мозку-пневмоцистної пневмонії - прогресивної багатоджерельної лейкоенцефалопатіі- токсоплазмозе мозку у пацієнтів старше 1 місяця-за наявності двох великих і одного малого симптому. Для лікування ВІЛ-інфекції застосовують препарати, що перешкоджають адсорбції вірусу на клітинах-мішенях: гепарин, декстрансуль-фат, троловол, анти-С04 AT.
Використовують засоби, що перешкоджають розмноженню ВІЛ в клітинах: азидотимидин (зидовудин, ретровір), 2 'З'-дідезоксіінозін (ві-декс) і 2' З'-дідезоксіцітідін (диданозин) та їх комбінації з азидотимідином, сурамин, що впливає на ревертазу, антисмислової олігонуклеотиди, інгібітори вірусних протеаз (препарат U-75875) і глікозилювання (N-бутил-дезоксіноіріміцін, рослинний алкалоїд - кастаноспермін), похідне діазепіну -TIBO (R82150, R82913), мурамілдіпептід, рибавірин, папаверин, антибіотики фторхінолони (офлоксацин, ципрофлоксацин, норфлоксацин , еноксацин), препарат з кореня солодки - ніглізін, пептид тріхосантініз коренів китайського огірка, препарати РС6 і РС7, виділені з шишок білої японської сосни, та ін.
Перспективно застосування AT проти вірусних білків. Застосовують гемосорбцию, імуносупресори, інтерферон, ІЛ та препарати тимуса (хоча про останні думка не однозначно і ряд дослідників не рекомендує їх застосовувати), іммунозаместітельная терапію, реалізують введення зрілих донорських лімфоїдних клітин, імутіола і амплігена, проводять нагрівання тіла до 42 С, використовують препарати з підшлункових залоз забійної худоби, що пригнічують репродукцію вірусу- аверол, виділений з морських губок, жовчні кислоти, мембранотропні ліпіди (12-метокси-ді-деканоат, амфотерицин В), антиоксиданти (дітіокарб, бутильований гідрокси-анізол), звіробій і т.д . Однак, ефективність описаних методів лікування інфекції невелика, мова може йти тільки про ремісії захворювання. Вони дозволяють продовжити життя при клінічно вираженому СНІДі до 2 років (без лікування - 6 місяців).
Минулі роки досліджень показали, що приготовані традиційними способами ВІЛ-вакцини не прийнятні. Певні надії покладаються на рекомбінантні препарати генно-інженерної технології: корова вакцина з генами ВІЛ, контролюючими освіту імуногенних гликопротеидов, оспенная вакцина, в яку вводять гени, відповідальні за синтез gp32, gpl20, gpl60 і т. Д. Розробляється ідея створення пептидних вакцин, що складаються з синтетичних пептидів, аналогічних антигенними епітопів ВІЛ. Такий підхід може призвести до синтезу тільки протективних AT, виключаючи підсилюють AT і аутоантитіла. Застосування окремих пептидів дозволяє отримати AT до них, проте вони не утворюються на ці ж послідовності, що входять до складу великої природної пептидного молекули вірусу. Нарешті, пептидні вакцини дозволять створити поліпептидні препарати, що складаються з набору різних варіантів пептидів, відповідних пептидам циркулюючих в даний час ВІЛ і навіть тим їх варіантам, які можуть з'явитися в майбутньому. В Інституті імунології, вдалося створити кон'югати пептиду з gp41 з синтетичними іммуноадьювантів (сополімер N-вініл-пірролідона з 1Ч-вініл-1,2,4-триазол), з синтетичними микросферами з N-вінілпіролідону, асоційованого з малеїновим ангідридом, і комплексом пальмітинової кислоти і хемоаттрактанти. Всі вони индуцировали синтез специфічних AT, що пригнічують освіту синцития і некроз в ВІЛ-інфікованих клітинах.
Найцікавіші новини