Досить часто в цитоплазмі нервових клітинах тканинної культури кори мозку виявляються локальні деструктивні зміни, міеліноподобние освіти і аутофаголізосоми. У контрольній групі експлантатов зрілі нейрони практично не виявляються. Відразу за проміжної зоною (в глиб експлантатов) локалізуються групи клітин з цитолизом, загиблі шляхом некрозу, і з морфологічними ознаками дегенерації і загибелі у формі апоптозу. При іммуноокрашіваніі на PCNA ядра проліферуючих клітин у контрольній групі відносно рівномірно розподілені в крайових зонах експлантатов кори, при цьому кількісна щільність PCNА-позитивних ядер складає 572 + 41 на 1 мм2 площі зони росту. У цих же зонах розташовується основна маса клітин з позитивною реакцією на ядерцеві організатори. Слід зазначити, що фарбування препаратів методом AgNOR дозволяє чітко диференціювати ядра нейрогліальних елементів, що мають довгасту форму, більш щільну каріоплазма і концентруються в крайовій зоні, від більш великих світлих ядер нейробластов, що утворюють зону росту експлантатов.
За даними комп'ютерного аналізу, кількісна щільність інтерфазних клітин в зоні росту відповідає 3832 + 81 на 1 мм2, а апоптотических клітин - 7587 ± 334. Середня площа зрізу ядер нейробластов становить 27,0 + 0,23 мкм2, а середній розмір однієї зони ядерцевого організатора - 1,53 ± 0,07 мкм2. В ядрах нейробластов виявляються від 1 до 5 зон ядерцевих організаторів, при їх інтегральному змісті 15,3 ± 0,7%. За даними комп'ютерного аналізу, після додавання кортагена кількісна щільність PCNA-позитивних ядер в органотіпіческой культурі кори мозку достовірно збільшується до 721 ± 49 (рlt; 0,05), а вміст ядер з позитивною реакцією на ядерцеві організатори досягає 4116 ± 48 (р = 0 , 02). Середня площа перетинів інтерфазних ядер зростає до 28,9 ± 0,29 мкм2, а розміри зон ядерцевих організаторів збільшуються на 16% (р = 0,02). Кількісна щільність апоптотичних клітин в крайових зонах експлантатов на 21% нижче, ніж у контролі і становить 5989 ± 320 (р-0,01). Аналіз кореляційних відносин між вивченими параметрами показує, що ефекти кортагена проявляються значною стимуляції проліферативної та функціональної активності основних клітинних елементів тканинної культури кори мозку.
Комплексний аналіз результатів гістохімічних, імуногістохімічних, електронно-мікроскопічних і кореляційних досліджень дозволяє стверджувати, що кортаген володіє специфічним нейротрофическим дією на органотипових культуру кори головного мозку тварин різного віку. Синтетичний тетрапептид кортаген має виражену стимулюючу дію на морфофункціональні характеристики соответетвующем органотипових культур. Об'єктивно реєстровані ефекти проявляються в морфологічної збереження тканинних культур, а також у посиленні клітинної та внутрішньоклітинної форм регенерації клітин. Позитивні ефекти кортагена корелюють з посиленням функціональної активності зон ядерцевих організаторів клітинних популяцій, специфічно чутливих до цього цитогенной. В умовах тканинної культури кори головного мозку 1-денних щурів проявляється тканиноспецифічну дію кортагена - він знижує рівень спонтанної загибелі нервових клітин, посилює регенераторно-адаптаційні процеси в пролиферирующих і дифференцирующихся нейробласти, тим самим надаючи нейротрофічну і стабілізуючу дію на морфологічну збереженість і регенерацію нервової тканини.
Таким чином, при дослідженні комплексних пептидів в органотіпіческой культурі тканин, узятих від молодих і старих тварин, виявлена тканеспеціфічность їх дії. Виражена тканеспеціфічность дії цитомединов по відношенню до тканин від старих тварин створює основу використання пептидних біорегуляторів в геріатричної практиці. При цьому ефекти пептидів в ряді випадків розрізняються залежно від віку тварин. Відомо, що процес старіння характеризується складним комплексом молекулярно-генетичних і біохімічних змін, що супроводжуються дезорганізацією пептідергіческой системи регуляції функцій організму. При вивченні процесів вікової інволюції органів і тканин організму виявлено зниження в них інтенсивності синтезу білка, продукції фізіологічно активних речовин пептидної природи, ослаблення чутливості до них клітин-мішеней, що дозволило зробити висновок про важливу роль пептидів у регуляції механізмів старіння. Результати біотестування пептидів в органотіпіческой культурі тканин, узятих від щурів різного віку, показали, що зі збільшенням віку тканини-мішені стають чутливими не тільки до впливу відповідних даної тканини пептидів, але і до впливу деяких інших пептидів. Це свідчить про координує дії пептидів на рівні міжклітинних взаємодій, порушується в процесі старіння.
У подальших дослідженнях, із застосуванням ряду біохімічних методів вивчення ліганд-рецепторних взаємодій, належить з'ясувати тонкі механізми регуляторного дії пептидів. Відомо, що інформаційні відносини, як усередині окремих функціональних систем, так і в міжсистемних зв'язках в цілому організмі, дуже чутливі до різних впливів. В основі цих процесів лежить диференційована селекція інформаційних сигналів пептидних молекул. Враховуючи той факт, що старіння супроводжується зміною експресії тканесіеціфіческіх генів, наслідком якого є порушення синтезу регуляторних пептидів в різних органах і тканинах, пептиди можна розглядати в якості інформаційного регуляторів генетичної стабільності.
Найцікавіші новини