При культивуванні тканини вилочкової залози 1-денний щури виявлено, що Вілон і тимоген пригнічують розвиток експлантатов при концентраціях 2 і 10 нг / мл. Так, при концентрації Вілона 2 нг / мл ІП експлантатов вилочкової залози був на 36 + 5% («= 10, рlt; 0,05) нижче контрольного значення ІП (п = 12), а при концентрації 10 нг / мл - на 21 + 5% (і = 12, рlt; 0,05) нижче контрольного значення ВП. Тимоген в тих же концентраціях викликав статистично недостовірне зниження ІП експлантатов на 12-18% порівняно з контрольними експлантатов. Тималін в концентраціях 5, 50 і 100 нг / мл викликав різку стимуляцію розвитку тканини вилочкової залози, що призводило до збільшення ІП експлантатов відповідно на 91 + 5% (і = 10, рlt; 0,05), 68 + 5% (я- 8, Рlt; 0,05) і 56 + 7% (л-11, рlt; 0,05) порівняно з контрольними значеннями ІП (і = 12). Збільшення концентрації тималина до 100 нг / мл призводило до пригнічення розвитку експлантатов вилочкової залози. У подальших дослідах на всіх тканинах використовувалися ефективні концентрації препаратів, які становили 2 нг / мл для Вілона і тимогена і 5 нг / мл для тималина. При культивуванні тканини вилочкової залози 21-денний щури спостерігалося протилежну дію Вілона і тимогена - була тенденція стимуляції розвитку експлантатов на 15-24% порівняно з контрольними експлантатов, проте не відбувалося статистично достовірного пригнічення, як це виявлялося при культивуванні вилочкової залози 1-денний щури . Ефективна концентрація тималина продовжувала стимулювати розвиток експлантатов вилочкової залози і 21-денних щурів: ІП експлантатов був на 200 + 15% («= 12, /? Lt; (), 05) вище контрольного значення ІП (я = 10).
Точно такі ж тенденції, залежно від віку тварин, від яких бралися тканини вилочкової залози, спостерігалися і при дії Кон А в концентрації 10 мкг / мл. У експлантатов від 1-денних тварин Кон А надавав, подібно ВІЛОНА і тимогену, гнітюче розвиток експлантатов дію, що призводило до зниження ІП на 34 + 7% в порівнянні з контрольними експлантатов. Однак у експлантатов вилочкової залози від 21-денних щурів вже виявлявся мітогенний ефект Кон А, що призводило до збільшення ІП на 24 + 1% порівняно з ІП контрольних експлантатов. При дослідженні можливого потенціюють Кон А і поліпептидних фракцій вилочкової залози виявилося, що спільне застосування Кон А і ефективних концентрацій Вілона призводить до протилежних дії Кон А результатами і також залежить від віку тварин, від яких бралися тканини для культивування. У експлантатов вилочкової залози 1-денний щури введення в живильне середовище Кон А і Вілона призводило до достовірного збільшення ІП експлантатов на 80 + 3% («= 16, рlt; 0,05) порівняно з контрольними значеннями ІП (« = 15), в той час як при ізольованому дії кожного з цих речовин відбувалося пригнічення розвитку культивованої вилочкової залози. І навпаки, в експлантатов вилочкової залози від 21-денних тварин при спільному застосуванні Кон А і Вілона ІП експлантатов був достовірно на 55 + 7% («= 14, рlt; 0,05) нижче контрольних значень ІП (« = 12), хоча ізольоване дію як Вілона, так і Кон А призводило до збільшення ІП експлантатов.
У тимогена, на відміну від Вілона, протилежне дії Кон А вплив спостерігалося тільки при культивуванні експлантатов від 1-денних тварин. Помітна тенденція до збільшення ІП експлантатов на 20 + 3% («= 18, рlt; 0,05) порівняно з контрольними значеннями ІП (« = 24) при спільному застосуванні тимогена і Кон А, хоча їх ізольоване застосування призводило до пригнічення розвитку культивованої вилочкової залози. У експлантатов від 21-денних тварин спільне застосування тимогена і Кон А також призводило до збільшення ІП на 30 + 2% («= 21, рlt; 0,05) порівняно з контрольними значеннями ІП (« = 20), т. Е. не було протилежного ізольованому дії обох препаратів ефекту. Тималін спільно з Кон А в експлантатов вилочкової залози від тварин обох вікових викликав зниження ІП експлантатов в порівнянні з контрольними значеннями, і, таким чином різке стимулюючу дію тималина зникало в обох випадках.
При культивуванні експлантатов селезінки також виявилися відмінності дії поліпептидних фракцій вилочкової залози і Кон А в зависмости від віку донора. У експлантатов селезінки 1-денних тварин дію ізольованих Вілона і Кон А за спрямованістю співпадало з їх дією на експлантати вилочкової залози тварин цього віку. Так, при дії Вілона ІП експлантатов селезінки достовірно знижувався на 40 + 7% («= 18, рlt; 0,05) порівняно з контрольними значеннями (я = 15). Кон А також викликав зниження ІП експлантатов на 42 + 2% («= 12, рlt; 0,05) порівняно з контрольними значеннями (і = 16). Однак спільне застосування Вілона і Кон А викликало стимуляцію розвитку експлантатов, і їх ІП збільшувався до 96 + 5% («= 14, рlt; 0,05) порівняно з ІП контрольних експлантатов (і = 18). Введення в культуральне середовище тимогена призводило до статистично достовірного збільшення ІП експлантатов селезінки на 26 + 5% («= 15, /? Lt; 0,05) порівняно з контрольними значеннями (« = 19), а спільне застосування ефективних концентрацій тимогена і Кон А викликало різку стимуляцію розвитку експлантатов, та ВП перевищував на 154 + 7% («= 12, рlt; 0,05) контрольні значення ІП (« -16). На відміну від експлантатов вилочкової залози щурів обох віку тималин не чинив істотного впливу на експлантати селезінки від 1-денний щури, проте спільне його застосування з Кон А викликало достовірне зниження ІП експлантатов на 51 + 7% («= 24, Рlt; 0,05 ) порівняно з ІП контрольних експлантатов («= 21).
Протилежне за спрямованістю культивуванню тканин 1-денний щури явище відбувалося при культивуванні селезінки 21-денний щури. Вілон збільшував ІП експлантатов, однак найбільш різка стимуляція проліферації лімфоцитів відбувалася при дії Кон А, що й призводило в цьому випадку до збільшення ІП експлантатов на 310 + 21% (і = 15, рlt; 0,05) порівняно з ІП контрольних експлантатов селезінки («= 18). Спільний вплив Вілона і Кон А викликало достовірне підвищення в порівнянні з контрольними значеннями («= 21) ІП експлантатов на 126 + 15% (« = 22, рlt; 0,05). Аналогічно, спостерігалося підвищення ІП експлантатов при дії тимогена - на 143 + 11% («= 17, рlt; 0,05) і при одночасному дії тимогена і Кон А - на 59 + 10% (« = 15, рlt; 0,05 ) в порівнянні з контрольними значеннями («= 14). Ефективні концентрації тималина стимулювали розвиток експлантатов, та ВП підвищувався на 44 + 7% («= Т5, рlt; 0,05) порівняно з контрольними значеннями (« = 16), але спільна дія тималина і Кон А призводило до недостовірного збільшення ІП експлантатов . Отримані дані свідчать про те, що при розвитку тканини вилочкової залози 1-денного тваринного Вілон і тимоген гнітили розвиток зони росту, а при культивуванні цієї тканини від 21-денного тваринного відбувалося явище протилежної спрямованості - Вілон і тимоген в тих же концентраціях стимулювали збільшення зони росту , і вона збільшувалася, в порівнянні з контрольними експлантатов, на 15-25%.
Аналогічна картина спостерігалася в культурах фрагментів селезінки від 21-денний щури, де тимоген збільшував ІП експлантатов на 143% порівняно з контролем. У культурі 1-денний селезінки тільки тимоген сприяв збільшенню ІП експлантатов на 60%, а Вілон знижував ІП на 38% порівняно з контролем. Таким чином, при культивуванні тканини селезінки тільки Вілон діяв так само, як він діяв у різновікових культурах тимуса, а дія тимогена в культурах селезінки 1 і 21-денних тварин було однаковим - стимулюючим. Тималін надавав виражену стимулюючу розвиток зони росту дію в культурах тимуса 1 і 21-денних щурів і в культурі селезінки 21-денний щури (ІП експлантатов збільшувався до 90-200% порівняно з контролем), і лише в культурі селезінки 1-денний щури тималин не тільки не чинив стимулюючої дії, але була тенденція до пригнічення розвитку зони росту. У дослідах із застосуванням Кон А виявилося, що його дія повністю збігається з дією Вілона, т. Е. В культурах тимуса і селезінки 1-денних тварин він пригнічує розвиток зони росту, що веде до зниження ІП експлантатов на 38-45%, а в культурах обох тканин від 21-денних щурів, навпаки, стимулює зону росту. Причому найбільш виражена стимуляція відбувається в тканинах селезінки 21-денних щурів, коли ІП експлантатов збільшується на 310% порівняно з контролем.
У проведених експериментах з сумісному застосуванні пептидів тимуса і Кон А виявлені наступні явища. У тканинах тимуса і селезінки 1-денних щурів Вілон спільно з Кон А приводив до достовірної стимуляції зони росту експлантатов, коли ІП збільшувався 25-80% порівняно з контролем. У попередніх дослідах виявилося, що роздільне застосування кожного з цих препаратів вело до пригнічення розвитку зони росту і зниження ІП експлантатов. Протилежна картина була в культурах тканин 21-денних щурів, в яких поєднане застосування Вілона і Кон А призводило до пригнічення зони росту, хоча роздільне застосування цих препаратів давало в попередніх дослідах стимулюючий ефект, особливо в селезінці. Так, в культурі тимуса 21-денний щури ІП експлантатов при одночасному застосуванні препаратів знижувався на 50% порівняно з контролем, а в культурі селезінки від тварини того ж віку, хоча ІП залишався підвищеним у порівнянні з контролем на 126%, але цей показник був значно нижче того, який реєструвався при окремому застосуванні Кон А (310%), т. е. відбувалося гальмування розвитку зони росту. Відносно тимогена в поєднанні з Кон А спостерігалася аналогічна картина, за винятком того, що в культурі тимуса 21-денний щури не відбувалося зняття ефекту стимуляції зони росту, як це відбувалося при дії Вілона. У культурі селезінки 21-денний щури яскраво проявлялося гальмівну дію спільного застосування тимогена і Кон А, коли ІП експлантатов ставав тільки на 55% вище, ніж у контролі, в той час як при ізольованому дії Кон А і тимогена ІП був на відповідно 310 і 143 % вище, ніж у контролі.
Відносно тималина не завжди спостерігався такий знімає дію Кон А ефект. Цей ефект реєструвався лише в культурах тканин від 21-денних щурів. Так, в культурі тимуса 21-денний щури, незважаючи на те що окремо тималин викликав значну стимуляцію ІП експлантатов (до 200% в порівнянні з контролем), при дії його спільно з Кон А відбувалося зниження ІП нижче контрольних значень. У культурі селезінки 21-денний щури ІП експлантатов при одночасному дії також знижувався з 310 до 28% .В культурах тканин 1-денних тварин тималин не відміняв ефекту дії Кон А. Таким чином Вілон діє на всі чотири досліджувані тканини, як і Кон А, т. е. на молодих тканинах включає програму гноблення клітин, а на старих включає проліферацію. На тимус діють як Кон А тільки Вілон і тимоген, причому у Вілона сильніше виражено пригнічення на 1-денних тканинах, а у тимогена сильніше стимуляція на 21-денних. Вілон в дозах 2 і 10 нг / мл діяв на всі досліджені тканини аналогічно дії конканавалін А - специфічного мітогена лімфоцитів, т. Е. В тканинах 1-денних тварин відбувалося пригнічення, а в тканинах 21-денних тварин - збільшення зони росту експлантатов після 3 доби культивування. Таким же чином впливав на експлантати тимоген в дозах 2 і 10 нг / мл, проте на відміну від Вілона він стимулював розвиток експлантатов селезінки 1-денних щурів. Тималін в дозі 5 нг / мл надавав стимулюючий вплив на розвиток експлантатов вилочкової залози тварин обох вікових і на розвиток експлантатов селезінки 21-денних щурів.
При одночасному застосуванні будь-якого з пептидів з конканавалін в дозі 10 мкг / мл виявлено ослаблення дії конканавалін, т. Е. На тканинах від 1-денних щурів Вілон і тимоген усували гнітюче розвиток експлантатов дію конканавалін, а на тканинах від 21-денних щурів , навпаки, - послаблювали стимулюючий розвиток експлантатов ефект конканавалін. Тималін знижував тільки стимулюючий вплив конканавалін на експлантати тканин від 21-денних тварин. Виявляється різна участь поліпептидних фракцій тимуса та їх синтетичних аналогів в процесах стимуляції і гноблення розвитку вилочкової залози і селезінки в різні вікові періоди онтогенезу ссавців.
Найцікавіші новини