У мозковій речовині кількість лімфоцитів істотно менше, ніж в кірковій, а клітинний склад представлений в основному епітеліальними клітинами. Невеликі групи епітеліальних клітин з великим світлим ядром і пилоподібним хроматином місцями формують щільні концентричні освіти - тіміческіе тільця, які переважно виявляються в кортико-мозкових відділах. Строма тимуса представлена сполучнотканинними і епітеліальними елементами, а клітинний склад паренхіми тимуса формують лімфоїдні клітини, плазматичні клітини і лейкоцити. При передчасному старінні (на 14-е і 21-у добу після опромінення груп 2, 2а) на гістологічних зрізах, забарвлених гематоксиліном і еозином, відзначається порушення структурної організації тимуса, що виражається, насамперед у атрофічних змінах. Кількість часточок і їх розміри значно зменшені. Поділ на коркова і мозкова речовина стирається, межа між шарами фактично зникає. У мозковій речовині незначно збільшений вміст лімфоцитів. Співвідношення між паренхімою і стромою порушено у бік збільшення останньої. Строма набрякла, набрякла, з рясною жировою інфільтрацією. Кортикальні тімоціти представлені переважно великими і середніми лімфоцитами. Часто виявляються фігури мітозів і деструкція лімфоцитів, ядра яких знаходяться в стані каріопікноз. У тимических тільцях відзначається розпад і дегенерація клітин.
При мікроскопічному аналізі препаратів тимуса тварин, яким після першого сеансу опромінення вводився Вілон (групи 3, За) відзначалися менш виражені інволютивні зміни в порівнянні з групами 2 і 2а. У тварин, яким вводився Вілон (група 4), гистоструктура тимуса зберігається, але на відміну від контролю має деякі особливості. Часточки значно більші, ніж у тварин контрольної групи. Корковаречовина широке завдяки, активної проліферації кортикальних тимоцитів, популяція яких представлена переважно дрібними і середніми лімфоцитами. Епітеліальні клітини значно гіперплазованих. Тимусні тільця численні і в більшості випадків клітини їх формують добре пофарбовані ядра. Судини вилочкової залози розтягнуті і повнокровні. Порівняльний аналіз стану огрядних клітин (мастоцитів) в тимусі свідчить про те, що їх об'ємна щільність у тварин груп 2а і За на 21-у добу після опромінення достовірно зростає в порівнянні з величиною цього показника у інтактних щурів.
Електронно-мікроскопічне вивчення тимуса тварин контрольних груп показало, що в кірковій речовині часточок тімоціти утворюють скупчення, що складаються з клітин, що мають подібні розміри і морфологічну структуру. Ці клітини мають великі ядра з конденсованим по периферії хроматином і одним-двома ядерця великого розміру і вузький обідок цитоплазми, що містить невелику кількість мітохондрій і полірібосом. Серед цих клітин зустрічаються великі тімоціти, що мають більш широкий ободок цитоплазми і містять велику кількість мітохондрій, - так звані активовані лімфоцити. Серед ретикулярних клітин в тимусі інтактних щурів більшість складають макрофаги. В їх цитоплазмі знаходяться численні первинні і вторинні лізосоми, а також фагосоми. Ступінь навантаженості останніх фагоцитовані матеріалом варіює.
При дослідженні судин в тимусі контрольних тварин видно, що ядра ендотеліальних клітин мають рівні контури, в цитоплазмі знаходяться канальці ендоплазматичної, помірна кількість невеликих мітохондрій, піноцитозні везикули. У просвіті судин, як правило, виявляються поодинокі еритроцити. Гладкі клітини зустрічаються в междольковой сполучної тканини, поблизу кровоносних судин. Вони мають ексцентрично розташоване ядро і цитоплазму, заповнену секреторними гранулами високої електронної щільності. Ретикуло-епітеліальні клітини, які найчастіше добре видно в мозковій речовині часточок, мають отростчатой форму, пухке ядро неправильної форми і цитоплазму, багату канальцами ЕПР. У цитоплазмі таких клітин зустрічаються нечисленні дрібні секреторні гранули високої електронної щільності. При передчасному старінні (після опромінення у тварин групи 2) серед найбільш виражених змін в тимусі відзначені наступні: відшарування ділянок зовнішньої ядерної мембрани, порушення тісних контактів між окремими тімоцітамі. Однак опромінення не применшує числа діляться тимоцитов, що знаходяться на різних стадіях мітозу. Збільшується частота народження макрофагів, в цитоплазмі яких відзначається поява великих цітолізосом.
У стінках кровоносних судин під впливом опромінення також виявляються ультраструктурні зміни. Вони пов'язані зі збільшенням щільності цитоплазми одних ендотеліальних клітин і набряком цитоплазми інших, розпушення базальної мембрани і розширенням периваскулярних просторів. Цитоплазма ендотеліальних клітин утворює численні тонкі вирости в просвіт судин. Спостерігається поява вакуолей і збіднення мітохондрій. Цитоплазма перицитів і їх відростки виглядають ущільненими. Серед огрядних клітин спостерігаються відмінності в реакції на опромінення. Так, одні клітини не відрізняються за своєю структурою від мастоцитов контрольних тварин, тоді як в інших спостерігається утворення обширних вакуолей, в яких одночасно може перебувати до десятка секреторних гранул різного ступеня електронної щільності, що відбиває різні стадії лізису секреторного матеріалу. У ретикуло-епітеліальних клітинах спостерігається помітне відшарування зовнішньої мембрани, розширення мембран ЕПР, поява численних дрібних вакуолей, набухання і лізис крист мітохондрій. Дрібні секреторні гранули в невеликій кількості зустрічаються в перинуклеарной просторі.
На 21-й день після початку експерименту у опромінених тварин (група 2а) в кірковій речовині часточок тимуса не спостерігається виражених змін в порівнянні з групою 2. Тимоцити мають дуже вузький обідок цитоплазми, в якій знаходиться обмежене число рибосом і мітохондрій. Серед діляться тимоцитов не відзначено появи клітин з патологічно протікають митозами. Мітохондрії в клітинах, що діляться помірної щільності, з добре збереженими кристами. Ретикуло-епітеліальні клітини нечисленні, а число секреторних гранул в їх цитоплазмі варіює від практично повної відсутності до деякого збільшення в порівнянні з їх кількістю в групі 2. З боку кровоносних капілярів зберігається деяка набряклість цитоплазми ендотеліальних клітин і периваскулярних просторів. Відсутні ознаки активності трансендотеліальную транспорту. Можна відзначити також помітне звуження просвіту дрібних капілярів. У тварин, яким вводився Вілон, на 14-у добу від початку опромінення виражених змін з боку тимоцитов не відзначено. У кірковій речовині тимуса вони розташовуються, тісно прилягаючи один до дру1, мають відносно однакові за розміром ядра з одним-двома ядерця. Ободок цитоплазми дуже тонкий, зустрічаються поодинокі мітохондрії, в яких добре проглядаються Крісті.
Серед тимоцитов є досить велика кількість клітин на різних стадіях поділу. При цьому помітних порушень в перебігу мітозу не виявлено. Часто зустрічаються макрофаги, іноді в їх цитоплазмі видно фагоцитовані клітини на пізніх стадіях деградації. З боку кровоносних судин спостерігається зменшення набряку цитоплазми ендотеліальних клітин і периваскулярних просторів. Помітно збільшена їх піноцітозная активність. У огрядних клітках, розташованих в междольковой сполучної тканини, не виявляється ознак, що свідчать про активізацію секреції речовин з них, швидше спостерігається посилення процесів синтезу - в цитоплазмі більшості мастоцитов відзначається присутність великої кількості секреторних гранул високої електронної щільності. У междольковой сполучної тканини відмічено появу еозинофільних лейкоцитів.
У ретикуло-епітеліальних клітинах спостерігається слабо виражене відшарування зовнішньої ядерної мембрани (каріолемми), зменшення вакуолизации цитоплазми, однак зустрічаються окремі вакуолі з гранулярним вмістом. Кількість гранул в таких клітинах невелика, іноді це поодинокі гранули. На 21-у добу після початку експерименту у тварин, які отримували Вілон (група За), звертає на себе увагу скупчення тучних клітин не тільки в междольковой сполучної тканини, але і в кірковій речовині часточок тимуса. Ці клітини містять у своїй цитоплазмі секреторні гранули різних розмірів і електронної щільності. При електронно-мікроскопічному дослідженні тимуса опромінених тварин, які отримували Вілон, спостерігається поява в кірковій речовині гранулярних лейкоцитів (переважно поліморТNF-ядерні, рідше еозинофільні), а також плазматичних клітин, розташованих невеликими групами. Ретикуло-епітеліальні клітини не виявляють виражених морфологічних змін, але кількість секреторних гранул в їх цитоплазмі невелика.
Таким чином, проведені дослідження показали, що при передчасному старінні, викликаному фракціонованим опроміненням в діапазоні сублетальних доз, в тимусі тварин, які отримували Вілон, виявляються особливості структурно-функціональної організації, які проявляються в основному на ультраструктурному рівні. Звертає увагу швидке відновлення структури судинної стінки і формування периваскулярного простору під дією Вілона. Інфільтрація коркового речовини зернистими лейкоцитами і плазматичними клітинами при цьому, можливо, пов'язана саме з інтенсифікацією репаративних процесів, так як відомо, що гранулоцити чутливі до активації різними гуморальними і клітинними факторами. Скупчення тучних клітин в кірковій речовині може бути викликане тим, що для остаточної диференціювання мастоцитов потрібна присутність IL-3, продуцируемого Т-лімфоцитами. При проведенні імуногістохімічних і гістохімічних досліджень з подальшим комп'ютерним аналізом мікроскопічних зображень було виявлено наступне.
У контрольній групі основна популяція проліферуючих клітин в тимусі інтактних тварин (1рспа = 26 + 3%) розташовується в кірковій речовині з тенденцією концентруватися в периферійній зоні часточок, контуріровани сполучнотканинними перегородками. У тимусі тварин контрольної групи гладкі клітини складають відносно невелику фракцію клітин (18 ± 5 на 1мм2) і зосереджені у вигляді характерних ланцюжків в тонких сполучнотканинних перегородках. Зміни в тимусі тварин при передчасному старінні (після загального гамма-опромінення в дозі 6 Гр) мають такі особливості: PCNA-позитивні ядра зосереджені переважно в периферійній зоні скорочених часточок. Звертає увагу збільшення числа огрядних клітин в сполучнотканинних перегородках. Високий IPCNA і гіперплазія гладких клітин свідчать про початок періоді поста відновлення тимуса.
Одночасне дію радіації та Вілона (3-тя група). У тимусі реєструється активізація відновних процесів за індексами проліферації. Ipcna досягає 55 ± 6%. Проліферативна активність зростає в екстрамедулярних зонах кровотворення. Звертає на себе увагу збільшення числа огрядних клітин в тимусі опромінених тварин після введення Вілона. У групі неопромінених тварин після введення Вілона найбільш істотний ефект реєструється по зміні проліферативної активності клітин в тимусі. Ipcna досягає 37 ± 3%. Ці дані відображають вплив Вілона на диференціювання і швидкість міграції морфологічно зрілих Т-лімфоцитів з коркового шару тимуса в мозкову речовину. Всі інші вивчені параметри в тимусі залишаються в межах варіювання морфофункціональних показників у контрольних тварин.
Найцікавіші новини