1) концентрація яєць на поверхні рідини (методи флотації, спливання);
2) концентрації яєць в осаді (методи осадження, седиментации).
Метод Калантарян (З флотаційним розчином). Заснований на тому, що в рідині з високою відносною щільністю яйця гельмінтів як більш легкі спливають на поверхню, де і концентруються.
Для цього використовується розчин Калантрян (1 кг нітрату натрію розчиняють в 1 л води-суміш кип'ятять до утворення плівки, остужают- відносна щільність розчину 1,38).
У хімічному стакані ретельно розмішують скляною паличкою 5-10 г фекалій зі 100-200 мл флотаційного розчину. Відразу після розмішуючи видаляють спливли на поверхню великі частки. Стаканчик покривають предметним склом так, щоб воно стикалося з поверхнею рідини. Якщо рідини мало, її слід долити до повного зіткнення суміші з предметним склом. Залишають для спливання яєць на 20-30 хв, після чого предметне скло знімають, кладуть під мікроскоп і переглядають без покривного скла.
Добре спливають всі яйця, в тому числі трематод, великих цестод і незапліднені яйця аскарид, яйця власоглава.
Метод Фюллеборна дозволяє досліджувати велику кількість матеріалу і широко використовується.
У невелику баночку (зазвичай мазевую) поміщають 5 г фекалій і ретельно розмішують з 20-кратним кількістю насиченого розчину хлориду натрію, додаючи його при помішуванні невеликими порціями. Спливли на поверхню великі частки видаляють шматочком паперу або картону, баночку до країв наповнюють розчином хлориду натрію і покривають предметним склом так, щоб нижня поверхня стикалася з рідиною. Баночку залишають стояти на 45-90 хв (протягом цього терміну яйця спливають і тримаються на поверхні суміші), потім предметне скло обережно піднімають, швидко перевертають і приставшую плівку микроскопируют під малим збільшенням без покривного скла.
Методом Фюллеборна добре виявляються яйця ціп'яка карликового і всіх нематод, за винятком незапліднених яєць аскарид. Так як яйця трематод, більшості цестод спливають, потрібно досліджувати і осад з дна баночки. Препарати з осаду мало прозорі, тому для просвітлення можна додати краплю гліцерину.
Метод Красильникова (Із застосуванням детергентів). Під дією поверхнево-активних речовин, що входять до складу детергентів (пральних порошків), яйця гельмінтів звільняються від фекальних мас і концентруються в осаді.
Для цього використовують 1% -ний розчин прального порошку "Лотос" (порошок висушують в сушильній шафі при 100 ° С протягом 1-2 ч-10 г сухого порошку розчиняють в 1 л водопровідної води).
У центрифужную пробірку поміщають грудочку калу і доливають розчин детергенту. Співвідношення калу до рідини 1: 10. Добре перемішують їх до утворення суспензії. Через 30 хв вміст пробірки струшують 1-2 хв і центрифугують 5 хв при 1500 об. / Хв. З осаду готують 2 препарати на одному склі.
У практиці роботи лабораторії користуються і іншим способом. У цьому випадку рідина не піддається центрифугированию, а відстоюється протягом 24 год для утворення осаду, з якого також готують мазки для микроскопирования.
Метод закручування (по Шульману) дуже простий, більш ефективний, ніж метод нативного мазка, однак обмежуватися їм при дослідженні на гельмінти можна. Він служить доповненням до методів концентрації яєць і личинок.
У невеликій баночці висотою 6-7 см ретельно розмішують 2-3 г випорожнень з 3-5-кратним кількістю води або ізотонічного розчину хлориду натрію. Після цього скляною паличкою роблять швидкі кругові рухи (закручування) протягом 1-2 хв. При круговому русі яйця і личинки збираються біля кінця скляної палички. Після закінчення закручування паличку з краплею суспензії швидко виймають, краплю поміщають на предметне скло, а потім мікроскопіруют.
Метод Бермана застосовується для виявлення личинок гельмінтів (угріци). Отриманий від хворого кал (краще свежевиделенних) у кількості 5 г поміщають на дрібну металеву сітку (зручна цеділка для молока) в скляну воронку, закріплену в штативі. На нижній кінець воронки надягають гумову трубку із затискачем (апарат Бермана). Сітку (цеділку) піднімають і в воронку наливають нагріту до 50 ° С воду таким чином, щоб нижня частина сітки була занурена у воду. Личинки з калу у зв'язку з термотропних активно виповзають в теплу воду і нагромаджується в нижній частині воронки. Через 2-4 год затиск відкривають, рідина випускають в одну або дві центрифужні пробірки. Цетріфугіруют протягом 2-3 хв, після чого швидко зливають поверхневий шар, а осад поміщають на предметне скло і досліджують під мікроскопом.
Найцікавіші новини