» » Дослідження клітин


Дослідження клітин

Дослідження клітин
Визначення кількості клітин в пунктаті. Пунктат кісткового мозку на годинниковому склі обережно розтирають скляною паличкою і швидко насмоктують в змішувач для еритроцитів, набирають 3-5% -ний розчин оцтової кислоти (розведення кісткового мозку можна також робити пробіркових методом по Миколаєву). Після цього роблять так само, як при підрахунку лейкоцитів крові.

Загальна кількість ядерних елементів коливається у великих межах, мабуть, внаслідок неоднакового складу кістковомозкової тканини в різних ділянках і різної домішки периферичної крові в пунктаті. У здорових людей кількість кістково-мозкових клітин становить від 45 тис. До 250 тис. В 1 мкл.

Мієлограма. Мазки пунктата кісткового мозку переглядають спочатку з малим збільшенням і відбирають ті, які містять найбільшу кількість клітин. При малому збільшенні потрібно ретельно переглянути по можливості всі мазки для виявлення комплексів атипових клітин, клітин Березовського-Штернберга, клітин Пирогова-Лангханса та ін. При цьому ж збільшенні потрібно звернути увагу на кількість мегакаріоцитів: чи є вони в мазках, багато їх чи мало. У тих випадках, коли в мазку не виявлятися або знаходять поодинокі мегакаріоцити, необхідно ретельно переглянути кінець мазка в "метелочкой", де вони іноді збираються у великій кількості. Після ретельного перегляду мазків приступають до диференціального підрахунку клітин кісткового мозку. Підраховують не менше 500 клітин і обчислюють відсоток кожного виду клітин.

Підрахунок можна проводити двома способами:

1) метод Кост. Вважають окремо клітини лейкопоезу і еритропоезу. Сосчітивать 500 (або 1000) клітин лейкопоезу, а кількість клітин червоної крові обчислюють на 100 клітин лейкопоезу;

2) метод Аринкіна. Вважають поспіль всі клітини кісткового мозку і обчислюють відсоток кожного виду клітин.

При оцінці пунктата кісткового мозку, крім кількості підрахованих клітин, необхідно враховувати і співвідношення між молодими і більш зрілими формами нейтрофілів - так званий кістковомозкової індекс дозрівання нейтрофілів. У нормі цей індекс менше 1 і дорівнює 0,6-0,8.

При оцінці мієлограми необхідно знати динаміку периферичної крові і стан хворого. Крім кількісних зрушень клітин лейкопоезу і еритропоезу, треба враховувати ступінь їх дозрівання. При збільшенні ерітробластіческіх і лейкобластіческіх елементів із затримкою їх дозрівання в периферичної крові може спостерігатися зменшення кількості лейкоцитів та еритроцитів. В інших же випадках (наприклад, при еритреми) в кістковому мозку відзначається збільшена кількість нормобластов без порушення їх дозрівання і збільшення числа еритроцитів у крові.



При оцінці пунктата кісткового мозку дуже важливо відношення кількості елементів лейкопоезу до числа ядерних елементів ерітробластіческого ряду. У здорових людей це співвідношення становить 4: 1 або 3: 1. Якщо кількість кістково-мозкових клітин збільшується в основному за рахунок клітин еритропоезу, це вказує на гіперплазію останнього, і співвідношення лейко / еритро зменшується, досягаючи величини 1: 1 і менше. Така картина спостерігається при різних формах недокрів'я (постгеморагічна, гемолітична і В12-дефіцитна анемія).

При нелеченной анемії Аддісона-Бірмера кількість клітин збільшується переважно за рахунок мегалобластов, а на початку ремісії - за рахунок ерітронормобластов. При цьому співвідношення лейко / еритро досягає 1: 8. При повної ремісії воно наближається до норми.

При зменшенні кількості клітин в кістковому мозку зменшення співвідношення лейко / еритро може бути і не пов'язане з гіперплазією еритропоезу, а є наслідком зменшення утворення клітин гранулопоеза. Така картина зустрічається при агранулоцитозе.

При одночасному зменшенні числа клітин лейкопоезу і еритропоезу може зберегтися нормальне співвідношення між ними, і в той же час обидва зазначених вище паростка будуть придушені. Подібний стан зустрічається при гіпо- та апластичні процесах. Різке збільшення кількості кістково-мозкових елементів із збільшенням співвідношення лейко / еритро свідчить про гіперплазії мієлоїдних елементів, зустрічається при лейкозі, інфекціях, інтоксикаціях і інших станах.



Для кількісної оцінки мегакариоцитов використовують такі методи:

1) підрахунок в камері;

2) підрахунок в мазках: по полях зору, по відношенню до кількості всіх ядерних клітин кісткового мозку.

Всі ці методи не є достатньо точними. Найбільш точне кількісне уявлення дає підрахунок їх в зрізах кісткового мозку, отриманого при трепанобиопсии.

Підрахунок в рахунковій камері. При розведенні пунктата кісткового мозку оцтовою кислотою (1: 20) відбувається гемоліз еритроцитів, що дозволяє робити підрахунок мегакариоцитов в рахунковій камері. Розведення пунктата кісткового мозку і методика підрахунку аналогічні підрахунку лейкоцитів у крові. Підрахунок виробляють на всій поверхні сітки, потім число полічених мегакариоцитов множать на розведення (20) і ділять на обсяг камери (3,2).

Мегакаріоцити в камері видно у вигляді великих клітин з поліморфним гіперсегментірованние ядром і широкою зоною цитоплазми. Недостатня точність методу обумовлена тим, що в камері не розпізнаються дрібні форми (мегакаріобласти, голі ядра та ін.), Які не потрапляють в рахунок. Перевага методу - рівномірний розподіл клітин в рахунковій камері. У здорової людини в 1 мкл пунктата кісткового мозку при підрахунку в рахунковій камері виявлено (за даними різних авторів) 63 + 10 і 83 ± 13,86 мегакариоцитов. У здорових дітей у віці від 5 місяців до 3 років загальна кількість мегакаріоцитів становить близько 116 ± 10,8 в 1 мкл пунктата.

Підрахунок в мазках по полях зору. В мазках пунктата кісткового мозку підраховують мегакаріоцити при малому збільшенні мікроскопа з виведенням середніх цифр.

Неточність методу обумовлена тим, що в мазках мегакаріоцити розташовуються нерівномірно, зосереджуючись більше по краях препарату і в кінці мазка. У здорової людини в мазках пунктата кісткового мозку в 250 полях зору міститься 5-12 мегакариоцитов.

Підрахунок в мазках по відношенню до числа всіх ядерних клітин. В мазках пунктата кісткового мозку при виведенні мієлограми (підрахунок не менше 500 клітин) відзначається відсоток мегакариоцитов. Недолік методу той же, що і при підрахунку в мазках по полях зору.

В середньому у здорової людини в пунктаті кісткового мозку кількість мегакаріоцитів становить 0,1-0,2%. Дані різних авторів свідчать про широкі коливаннях відсотка мегакариоцитов в мазках пунктата кісткового мозку - від 0 до 1,2%, в середньому він становить 0,4 ± 0,18%.

Різке збільшення кількості мегакаріоцитів в кістковому мозку спостерігається при мієлопроліферативному синдромі, особливо при поліцитемії, а також при ідіопатична тромбоцитопенічна пурпура (хвороби Верльгофа), при цирозі печінки з явищами гиперспленизма. Збільшення числа мегакаріоцитів виявляється при злоякісних новоутвореннях, при симптомі геморагічної тромбоцітеміі, після гострої крововтрати. Зменшення кількості мегакаріоцитів характерно для більшості системних гіперпластичних процесів.


Найцікавіші новини


Увага, тільки СЬОГОДНІ!

Увага, тільки СЬОГОДНІ!