Білірубінурія спостерігають головним чином при ураженнях паренхіми печінки (паренхіматозні жовтяниці) і порушенні відтоку жовчі (обтураційні жовтяниці). Для гемолітичної жовтяниці білірубінурія нехарактерна, оскільки гемобілірубін (непрямий білірубін) не проходить через нирковий фільтр.
Більшість якісних проб для виявлення білірубіну в сечі засноване на його перетворенні під дією окислювача в зелений биливердин або пурпурно-червоні біліпурпуріни, які, примешиваясь до биливердина, дають синє забарвлення.
Уніфікована проба Фуше
Необхідні реактиви
1. 15% -ний розчин хлориду барію.
2. Реактив Фуше: 25 г трихлороцтової кислоти розчиняють у 100 мл дистильованої води і доливають 10 мл 10% -ного розчину хлорного заліза (FeCl3).
Хід дослідження
До 10 мл сечі додають 5 мл 15% -ного розчину хлориду барію. Змішують, фільтрують. На вийнятий з воронки і розправлені на дні чашки Петрі фільтр наносять 2 краплі реактиву Фуше. Поява на фільтрі синьо-зелених плям говорить про присутність білірубіну. Якщо реакція сечі лужна, то необхідно підкислити її декількома краплями оцтової кислоти.
Уніфікована проба Розіна
Необхідний реактив
1% -ний спиртовий розчин йоду.
Хід дослідження
У пробірку наливають 4-5 мл сечі і обережно, по стінках пробірки, нашаровуються розчин йоду. Поява на кордоні між рідинами зеленого кільця говорить про наявність білірубіну.
Проба Готфріда
Принцип методу - білірубіну глюкуронід (холебілірубін) при з'єднанні з диазотированного сульфаниловой кислотою (діазобензосульфоновая кислота) дає рожеве забарвлення за рахунок утворення білірубіну.
Необхідні реактиви
1. 10% -ний розчин хлориду барію.
2. Діазореактів: діазораствор I - 5 г сульфаниловой кислоти розчиняють у невеликій кількості води, додають 15 мл концентрованої HCl і доливають до 1000 мл дистильованою водою.
3. Діазораствор II - 0,5% -ний розчин нітрату натрію. Безпосередньо перед визначенням змішують 10 мл діазораствора I і 0,25 мл діазораствора II.
4. Спирт етиловий 96% -ний.
5. 6% -ний розчин двузамещенного фосфату натрію.
Хід дослідження
До 10 мл сечі, підкисленою декількома краплями оцтової кислоти, додають 5 мл 10% -ного розчину хлориду барію, перемішують, фільтрують через паперовий фільтр. Фільтр розкладають на дні чашки Петрі і на осад, що містить білірубін, капають 1-2 краплі свежеприготовленной діазосмесі, 4 краплі спирту і 1 краплю двузамещенного фосфату натрію. При позитивній пробі виходить червоно-фіолетове забарвлення.
Цей принцип ліг в основу експрес-тестів для визначення білірубіну, що випускаються зарубіжними фірмами "Ames" (Англія), "Boehringer" (Німеччина) та ін.
Найцікавіші новини