У праву капілярну піпетку віскозиметра набирають дистильовану воду до позначки "0". У лівий капіляр насмоктують кров з пальця також до нульової позначки. Провертають триходовий кран таким чином, щоб з'єднати обидві капілярні піпетки з гумовою трубкою, через яку втягують повітря з обох піпеток для утворення вакууму. При цьому стовпчики води і крові просуваються вперед з різною швидкістю, яка залежить від в'язкості. Як тільки стовпчик крові дійде до позначки "1", втягування повітря припиняють. За цей час вода, що володіє меншою в'язкістю, просувається значно далі, ніж кров. В'язкість крові визначають по довжині шляху, пройденого водою, який відлічується за шкалою градуйованою піпетки. В'язкість крові в нормі для чоловіків дорівнює 4,3-5,4, а для жінок 3,9-4,9 поділок шкали.
Спостерігається залежність в'язкості крові від кількості та обсягу еритроцитів, загального вмісту білка і співвідношення його фракцій в плазмі, а також від вмісту в крові вуглекислоти. Підвищення в'язкості відзначається при згущенні крові і деяких видах лейкозів (еритреми, Мієлофіброз), зниження - при анеміях.
Визначення швидкості осідання еритроцитів здійснюється мікрометодом в модифікації Панченкова. Визначення проводять в спеціальних градуювальних капілярах, що мають просвіт 1 мм і довжину 100 мм. Піпетку попередньо промивають 3,7% -ним розчином цитрату натрію, потім набирають цей розчин в піпетку до позначки "70" (30 мкл) і виливають на дно пробірки Відаля. Кров з пальця насмоктують тим же капіляром - спочатку цілий капіляр, потім ще до позначки "80" (120 мкл). Кількість цитрату і крові може бути різне - 25 мкл цитрату і 100 мкл крові, 50 мкл цитрату і 200 мкл крові, але співвідношення їх має бути обов'язково 1: 4. Кров поміщають в пробірку з цитратом і після ретельного перемішування знову набирають в капілярну піпетку до мітки "0". Капіляр з цитратной кров'ю ставлять в штатив вертикально між двома гумовими прокладками і залишають на 1 ч. Потім визначають величину осідання по стовпчику плазми над осілими еритроцитами. Розподіл капілярної піпетки, відповідне кордоні плазми і еритроцитів, записують як величину швидкості осідання еритроцитів в міліметрах на годину (мм / год).
Швидкість осідання еритроцитів у нормі змінюється залежно від віку і статі. У новонароджених швидкість осідання еритроцитів рідко вище 2 мм / ч- діти мають більш низьку швидкість осідання (1-8 мм / год), ніж дорослі, а особи середнього віку менше, ніж старі. У чоловіків швидкість осідання еритроцитів більш низька (в середньому 5 мм / год, коливання від 1 до 10 мм / год), ніж у жінок (в середньому 9 мм / год, коливання від 2 до 15 мм / год).
Оскільки швидкість осідання еритроцитів залежить в основному від білкових зрушень (збільшення вмісту фібриногену, # 945-2-глобулінів, # 947 - глобулінів), то збільшення швидкості осідання еритроцитів спостерігається при всіх станах, що супроводжуються запаленням, деструкцією сполучної тканини, тканинним некрозом, маглінізаціей, імунними порушеннями.
Визначення гематокриту. Гематокрит - це співвідношення між обсягом формених елементів крові і обсягом плазми. Метод заснований на поділі плазми і еритроцитів з допомогою центрифугування. Визначення проводять в гематокріческой трубці, що представляє собою скляну піпетку, розділену на 100 рівних частин. Перед взяттям крові гематокріческую трубку промивають розчином гепарину або щавлевокислих солей (0,82 г оксалату калію, 1,2 г оксалату амонію і 100 мл дистильованої води). Потім набирають у трубку капілярну кров до позначки "100", закривають гумовим ковпачком і центрифугують протягом 1-1,5 год при 1,5 тис. Об. / Хв. Після цього відзначають, яку частину в градуйованою трубці складають еритроцити.
Гематокритное величину визначають за допомогою відлікової шкали, що додається до центрифузі. У нормі обсяг маси еритроцитів менше обсягу плазми. Гематокритна величина у жінок становить 36-42%, у чоловіків - 40-48%. Збільшення гематокриту спостерігається при еритреми і зневодненні організму, зменшення - при анеміях.
Завбільшки гематокриту користуються для розрахунку маси еритроцитів, що циркулюють в крові, і деяких інших показників крові, наприклад середньої відсоткової концентрації гемоглобіну в одному еритроциті та середнього обсягу одного еритроцита.
Практично середній обсяг одного еритроцита визначають за формулами:
1) величину гематокриту в об'ємних відсотках множать на 10, потім ділять на число мільйонів еритроцитів в 1 мкл крові;
2) величину гематокриту, помножену на 100, потім також ділять на число мільйонів еритроцитів в 1 мкл крові.
Визначення резистентності еритроцитів. Резистентність - властивість еритроцитів протистояти руйнівним впливам: осмотическим, механічним, тепловим та ін. У клініці найбільше значення набуло визначення осмотичної резистентності. Еритроцити в гіпертонічних сольових розчинах зморщуються, а в гіпотонічних - набухають. При значному набуханні настає гемоліз.
Готують в пробірках розчини хлориду натрію різної концентрації (від 0,7 до 0,22%), потім вносять у них один і той же об'єм крові (0,02 мл) і залишають на 1 год при кімнатній температурі. Через 1 год пробірки центрифугують і визначають початок гемолізу по легкому порозовенія розчину і повний гемоліз - за інтенсивною червоно-лакової забарвленні розчину. У нормі мінімальна резистентність у дорослих людей коливається між 0,48-0,46% NaCl, максимальна - між 0,34-0,32% NaCl.
Осмотична резистентність лейкоцитів. Визначення осмотичної стійкості лейкоцитів (по Сторт і Кучера). Після контакту з гіпотонічним розчином хлористого натрію лейкоцити фарбують і потім підраховують незруйновані форми. Для цього використовують 0,2% -ний розчин NaCl, метілрозанілін (1% -ний водний розчин) - 1,5 мл або метилвіолетом тій же концентрації та обсягу, оцтову кислоту крижану - 1,0 мл, дистильовану воду - 20 мл. 0,1 мл крові з пальця змішують в пробірці з 0,9 мл хлористого натрію. Перед підрахунком в камері Горяєва 0,1 мл отриманої суспензії змішують з 0,1 мл метілрозаніліна або метилвіолетом. Після повторного збовтування заповнюють камеру. Підрахунок незруйнованих клітин проводиться через 30, 60, 120 і 180 хв.
У здорових людей непошкодженими через 30, 60, 120 і 180 хв залишаються в середньому 94, 82, 43 і 26% полінуклеарів і відповідно 86, 68, 42 і 25% мононуклеаров. При сепсисі, пневмонії стрептококової етіології спостерігається зниження осмотичної стійкості полінуклеарів з подальшою нормалізацією в період ремісії. Підвищення осмотичної стійкості полінуклеарів відзначено при грипозної пневмонії і в окремих випадках при злоякісних новоутвореннях.
Найцікавіші новини