Для визначення резус-фактора на дно пробірки поміщають краплю стандартного реагенту (сироватки анти-Rho (D)) і краплю досліджуваної крові. Все ретельно перемішують струшуванням і перевертають протягом 3 хвилин. У пробірку додають 2-3 мл изотопического розчину натрію хлору і перемішують шляхом триразового перевертання пробірок.
Якщо відзначається аглютинація у вигляді великих пластівців, це вказує на резус-позитивну приналежність, за відсутності аглютинації реакція вважається негативною. При гемотрансфузії, крім зазначених методів, виробляють визначення групової та резусную сумісності донора і реципієнта.